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QPCR: Müssen beide Primer eine GC-Klemme enthalten, um wirksam zu sein?

QPCR: Müssen beide Primer eine GC-Klemme enthalten, um wirksam zu sein?


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Ich entwickle Software, die unter anderem Primerpaare (vorwärts und rückwärts) für qPCR entwirft. Bei meinen Recherchen zu verschiedenen Eigenschaften habe ich über GC-Klemmen gelesen und verstehe die Grundlagen, denke ich. Mir ist noch etwas unklar.

Müssen beide Primer eines Paares eine GC-Klemme haben, damit sie wirksam ist? Oder erhöht ein GC-Clamp-in, sagen wir der Vorwärtsprimer, nur die Spezifität, und beide Primer, die eine Muschel enthalten, erhöhen sie noch mehr?


Sie können GC-Klemmen (3' Terminal .) habenG/C) in beiden Primern; dies kann insgesamt die PCR-Effizienz verbessern. Sie sollten jedoch darauf achten, nicht zu viele zu setzenG/CS. Dies kann zur Stabilisierung von Primerpaaren führen, was zur Bildung von Primer-Dimeren führt. Siehe auch diesen Beitrag: Wie wichtig ist die GC-Klemme beim Design von Primern?

GC-Klemmen sind nicht immer zwingend erforderlich und Sie sollten sich auch andere Parameter ansehen.


Schau das Video: qPCR real-time PCR protocol explained (Juli 2022).


Bemerkungen:

  1. Tell

    Meiner Meinung nach ist dies offensichtlich. Ich werde nicht kommentieren.

  2. Salhdene

    Meiner Meinung nach liegst du falsch. Ich kann meine Position verteidigen. Schreiben Sie mir in PM, wir werden reden.

  3. Tokree

    All dies nur die Konvention

  4. Bradbourne

    Nur wenige sind in der Lage zu glauben.

  5. Mikak

    Ich bestätige. Und ich bin darauf getroffen. Wir können über dieses Thema kommunizieren. Hier oder bei PM.

  6. Mezit

    I actually didn't like it)

  7. Kegami

    Ich bin mit diesen nicht einverstanden



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